Isolement, identification et diversité génétique par les marqueurs moléculaires des bactéries lactiques qui présententl’activité protéolytique isolées du lait de Chèvre
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Date
2020
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Publisher
Université Oum El Bouaghi
Abstract
Notre thème est de mettre en évidence de l’activité protéolytique des souches de bactéries lactiques isolées à partir de lait de chèvre sur milieu M17 et MRS et leur typage par les marqueurs moléculaire RAPD-PCR.
Dans la première partie, une recherche bibliographique concernant l’espèce animale, les caractéristiques physicochimiques et nutritionnelles du lait de chèvre. En deuxième section une étude microbiologique de la flore lactique a été réalisée. La mise au point des processus de l’activité protéolytique a été détaillée en troisième partie de l’étude. Les différentes méthodes de typage et de l’étude du polymorphisme génétique des bactéries lactiques sont décrites dans le cinquième chapitre. Et vue les conditions épidémiologiques de la pandémie (Covid-19) qui ont régné pendant plusieurs mois de l'année scolaire, la réalisation pratique de l’étude n’a pas été effectuée. Dans ces conditions, un protocole expérimental a été proposé et détaillé théoriquement. Commençant par l’isolement et la purification des isolats qui présentent des activités de protéolyse sur milieu gélose –lait par méthodes des spots. Cette dernière est ensuite confirmée par méthode électrophorétique dans les conditions dénaturantes (SDS-PAGE). Un typage moléculaire des isolats pour l’appréciation de la diversité génétique est présent. Pour cela la technique des marqueurs moléculaire RAPD-PCR a été expliquée. L’analyse des diagrammes éléctrophorétiques permet d’évaluer le polymorphisme intra et inter –spécifique de ces isolats. Des matrices de corrélations ainsi que des arbres hiérarchiques peuvent être construites pour déterminer les apparentés et les distances génétiques entre les isolats protéolytique.
Mots
Description
Keywords
Bactérie lactique, Diversité génétique, Lait de chèvre, Protéolyse, SDS-PAGE, RAPD-PCR,