Isolement et purification l'aspartyl- protéase produite par fermentation fongique
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Date
2021
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Publisher
Université Oum El Bouaghi
Abstract
Ce travail montre l'isolement et la purifcation de l'aspartyl-protèase fongique. L'aspartyl-protèase secrétée dans les milieux de cultures peuvent être exo-cellulaire ou endo-cellulaire.
La purification des protèase passe en trois grandes étapes : extraction, séparation (isolement) et une purification. A la fin de l'étape d'extraction on montre que :
A partir d'une culture fongique ou culture microbienne, suivi d'une filtration et centrifugation on obtenus trois résultats qui sont : broyat mycélien ou d'une broyat membranaire, nous avons extrait des enzymes exo-cellulaire, mais a partir d'un filtrat nous avant extrait des enzymes exo-cellulaire.
On remarque que toutes les opération d'isolement et de purification de l'aspartyl-protèase sont effectuée a froid (de 0° C jusqu'a 4° C). Il sont passé en trois grande étapes :
L'isolement nécessite l'application de l'une des technique suivant :
Sonication, congélation-décongélation, broyage ou agitation avec des abrasifs, désintégration à haut pression , lyse ( chimique ou enzymatique)
Fractionnement par précipitation : la précipitation nécessite l'ajout d'une solution alcoolique de tanin à 3 pour cent jusqu'à 3 pour mille, ou bien par ammonium de sulfate qui est utilisée a trois pourcentages (30, 65, 80).
Purification par combinaison au moins de deux techniques chromatographique.
Description
Keywords
fermentation, Isolement, Purification