Screening phytochimique & investigation biologique (évaluation in vitro des effets anti-inflammatoires, antimicrobiens, antidiabétiques et toxicités) d'une plante médicinale du Sahara Algérienne appartenant à la famille des astéracées
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Date
2023
Authors
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Publisher
Université d'Oum El Bouaghi
Abstract
Cette recherche consacre le thème du mémoire à la réalisation de deux axes fondamentaux et principaux : un axe phytochimique en premier lieu, et en second lieu un axe biologique, pour plusieurs extraits obtenus par plusieurs techniques d'extraction (macération, extraits de plus en polarité croissante, Soxhlet, ainsi que des huiles essentielles) à partir des parties aériennes pour une plante médicinale, où les feuilles ont été séparées des fleurs, et chaque partie a été étudiée d'une façon séparée et individuelle, la matière première a été collectée dans le désert algérien au stade de floraison, et elle appartient à la famille des Astéracées, afin de valoriser la flore algérienne et ses substances naturels algériens.
Méthodologie et méthodes utilisées : Ce travail vise principalement à réaliser les protocoles suivants :
I. Un criblage phytochimique visant à caractériser différentes classes de métabolites secondaires de trois manières : sur tous les organes de la plante (tiges, feuilles et fleurs) ; par extraits, ainsi que par chromatographie sur couche mince (CCM) sur gel de silice ; Ensuite, nous avons réalisé des tests sur différentes phases mobiles par chromatographie analytique sur couche mince pour avoir un aperçu de nos extraits et confirmer leur richesse. Nous avons ensuite procédé directement au dosage quantitatif des flavonoïdes, des polyphénols, des sucres totaux et des pourcentages de matières grasses en utilisant des méthodes colorimétriques appropriées et des réactions qualitatives.
II. Des évaluations biologiques in vitro ont été effectuées sur tous les extraits obtenus, en se concentrant sur les activités suivantes :
- Antioxydants (quatre méthodes) : DPPH ; ABTS ; FRAP ; Phénanthroline ;
- Activité enzymatique antidiabétique (-amylase) basée sur la méthode de microdilution utilisant des plaques multi-puits de 96;
- Activité antimicrobienne : (activité antibactérienne sur deux souches, activité antifongique sur une souche par diffusion) ;
- Enfin, l'activité de toxicité chronique a été testée par (examen des vers d'algues).
Résultats et discussion :
Le criblage phytochimique a montré que nos extraits (feuilles et fleurs) contiennent divers types de métabolites secondaires et en quantités variables tels que : flavonoïdes, terpénoïdes, stérols, tanins, saponosides, alcaloïdes anthraquinones et coumarines.
Le test de chromatographie en couche mince (CCM) (sur gel de silice) a montré la richesse de l'extrait d'acétate d'éthyle AcOEt et qu'il est plus riche que les deux extraits de n-BuOH, suivi du cyclohexane et du chloroforme (CHCl3).
L'extrait AcOEt enregistre un teneur maximum de polyphénols (422,63 ± 142,19 µg EAG/ mg) suivi par n-BuOH à un bon taux par rapport à ceux trouvés dans l'extrait chloroformique et le n-hexanique, tandis que pour l'extrait cyclohexane cela donne un pourcentage moyen.
Alors que la concentration la plus élevée de flavonoïdes a été mesurée dans l'extrait d'acétate d'éthyle (433,55 ± 0,89 µg EAG/mg) suivi du butanol normal et du chloroforme, comme pour les extraits d'hexane et de cyclohexane, des niveaux moyens ont été montrés par rapport à AcOEt.
L'extrait d'acétate d'éthyle des fleurs a montré une bonne activité avec toutes les activités testées ; La mesure quantitative des sucres totaux et de la teneur en matières grasses des feuilles et des fleurs a donné un pourcentage moyen: (8,17 ; 7,67 ( g/mL ; 0,4 % ; 3,96 %), respectivement.
L'extrait AcOEt et n-BuOH (fleurs, feuilles) aégalement donné une activité antioxydante par toutes les méthodes plus forte que tous les extraits testés, suivi du chloroforme, Cyclohexane et n-Hexane.
L'huileessentielledefleursetdefeuillesamontrédesvaleursassezfaibles(12,37±3,39) ;(9,21±0,92) µg EAG/ mg.
D'autrepart,l'extraitden-BuOHetAcOEtontmontréuneactivitéenzymatiqueanti-diabétique.
L’AcOEt,lecyclohexaneetlen-BuOHontmontrédeseffetsanti-inflammatoiresefficaces.L'acétated'éthyle, Cyclohexaneetn-Butanolontmontrédeseffetsanti-inflammatoiresefficaces.En ce qui concerne l'activité antibactérienne, l'extrait d'hexane et les huiles essentielles ont également montré une activité antibactérienne importante contre la souche S. aureus par rapport à tous les extraits. En outre, le cyclohexane a donné une activité antifongique efficace sur la souche Fusarium oxysporum f. sp lycopersiciFOL strain 4287suivi de l'extrait de chloroforme. Des étudesdetoxicitéontprouvéquetouslesextraitstestésétaientinefficaces.
Perspectives d'avenir : Les résultats obtenus sont très encourageants pour poursuivre la recherche en séparant les métabolites secondaires et en identifiant les molécules actives responsables des activités auxquelles nous sommes parvenus sur les extraits efficaces, notamment les fleurs, utilisant des méthodes spectroscopiques et toutes les analyses physico-chimiques modernes et avancées. Comme pour les huiles essentielles leur composition chimique se fait par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse il s'agit d'une part, et d'autre part, de mener des activités in-vivo pour chacun des extraits et molécules actives in-vitro, dans le but d'achever définitivement la recherche sur la plante étudiée, afin de valoriser et mettre en valeur la richesse végétale, notamment du désert algérien.